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无外泌体胎牛血清EXO-Free FBS Media

简要描述:使用无外泌体胎牛血清EXO-Free FBS Media,您可以确信您分离的外泌体是由培养细胞产生的,而不是培养基中的污染物。

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  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2019-09-26
  • 访  问  量:2259
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应用领域医疗卫生,化工,生物产业,制药

无外泌体胎牛血清EXO-Free FBS Media

NANOLAB品牌无外泌体胎牛血清

(EXO-Free FBS Media)

货号:360-23

规格:50ml/瓶

保存温度:-20℃

品牌:NANOLAB

产品描述:当外泌体在1980年*被发现后,其被认为是细胞排泄废物的一种方式,近的研究发现外泌体在很多生理病理上起着重要的作用,这些发现点燃了人们对细胞分泌膜泡的兴趣。exosome及其他细胞外囊泡正起着*的细胞通讯作用。在肿瘤发展过程中,exosome介导了关键的步骤,如刺激血管生成,削弱免疫反应,甚至参与了转移前微环境的形成。在正常的生理过程中,exosome也起了重要作用,如胎盘exosome帮助形成对母亲免疫系统的免疫抑制屏障。总之,在正常和病理的条件下,细胞都释放小囊泡,以各种方式影响其他细胞。

无外泌体血清可以特异性激发一些细胞反应,表明它们可以在作为治疗递送载体方面有巨大的潜力。无外泌体血清的囊泡性质使得它们适合作为用于药物或核酸递送的潜在纳米载体。在这里,研究人员需要解决的问题是,无外泌体血清的大小分布也会影响外泌体的治疗潜力。

1:利用聚合物沉淀分离的外泌体比超离法的粒子分布要小。

2:划痕实验证实聚合物沉淀所得的小粒径的外泌体被细胞摄取后迁移更快

产品应用                         

360-23  EXO-Free FBS Media (无外泌体胎牛血清)操作手册:

 对比

1):EXO-Free FBS Media大大降低了牛外泌体的含量

2):EXO-Free FBS Media去除了牛 CD63 外泌体

3):EXO-Free FBS Media 比超速离心FBS更*

4):EXO-Free FBS Media 具有无法检测的牛microRNA水平

5):EXO-Free FBS Media与标准FBS的细胞生长曲线几乎*

EXO-Free FBS Media大大降低了牛外泌体的含量

使用NANOLAB品牌Exo-FBS确保您的细胞或组织培养基中的外泌体制备仅包含来自细胞的外来体,而不是来自培养基中的FBS。 ELISA和NanoSight分析均证明,与标准FBS相比,Exo-FBS中牛外来体水平显着降低。

NanoSight粒子分析在Exo-FBS中显示超低外泌体残留量

为了证明我们的Exo-FBS产品中外泌体的消耗,我们将标准FBS和Exo-FBS样品1:1000稀释,然后使用NanoSight LM10仪器分析粒径和丰度。 标准FBS样品显示显着量的外来体大小的微泡,其中Exo-FBS外泌体耗尽的FBS样品具有外来体颗粒的急剧减少。

 

四跨膜蛋白CD63蛋白是外泌体的常见标记物。 我们利用牛特异性抗CD63抗体开发酶联免疫吸附测定(ELISA)。 在该ELISA测定中使用等体积(50μl)的标准FBS或Exo-FBS耗尽的培养基补充物。 与标准FBS相比,Exo-FBS中CD63阳性牛外来体的量显着减少(绘制的结果标准化为标准FBS的信号水平)。

NANOLAB品牌Exo-FBS比超速离心FBS更清洁

 

通过将NanoSight颗粒计数分析与源FBS,FBS超速离心18小时和外泌体耗尽的Exo-FBS产品进行比较,在NANOLAB生产的每批Exo-FBS上生成质量控制数据。 所有样品以1:100稀释,并一式三份收集NTA数据。

结论:

使用NANOLAB品牌不含外泌体胎牛血清,您可以确信您分离的外泌体是由培养细胞产生的,而不是培养基中的污染物。

NANOLAB品牌不含外泌体胎牛血清具有无法检测的牛microRNA水平

NANOLAB品牌不含外泌体胎牛血清不仅具有大大降低的外泌体水平,不含外泌体胎牛血清中的牛microRNA在高灵敏度qPCR测定中显示不可检测。 用Trizol提取方法处理标准FBS和Exo-FBS培养基补充物(4ml)以回收外来体RNA。 将RNA转化为cDNA,并使用QuantiMir系统通过qPCR测量72个单独的牛microRNA。 在测试的72种微RNA中,12种在FBS样品中产生扩增曲线,但在Exo-FBS样品中没有。

 

Exo-FBS与细胞生长的标准FBS相同

Exo-FBS不仅能够有效隔离标准FBS中存在的污染物的外泌体,它支持与标准FBS相同的生长速率。

为了比较Exo-FBS与标准FBS中细胞的生长速率,我们在10%标准FBS或添加10%的Exo-FBS的*培养基中培养HT1080纤维肉瘤细胞,PC-3前列腺癌细胞,MCF-7乳腺癌细胞和HEK293细胞。。 将细胞接种于10,000或20,000个细胞,然后在标准条件下在37℃,5%CO 2下在所示培养基中培养5天。 对细胞进行成像,计算生长速率并观察细胞形态。 对于在这4种细胞系中测试的标准FBS和Exo-FBS培养基,观察到等同生长和类似的细胞形态。

 

 


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